光譜帶寬,是紫外分光光度計的一個重要技術(shù)指標,很多人都不太清楚該指標對于儀器來說有什么關系,今天小編簡單為大家做一個介紹。
光譜帶寬是紫外分光光度計分析誤差的主要來源,一般來說,吸光度測量的準確度,取決于儀器的光譜帶寬與樣的自然帶寬的比率,自然帶寬被定義為大吸收值的1/2處的吸譜帶寬度。實驗表明,光譜帶寬與自然帶寬的比例小于0.1時,吸光度準確度可高達99.5%;如果比例增大,則吸光度測量誤差會增加,當自然帶寬大于或等于20時,2nm的光譜帶寬對于吸光度的準確測定是足夠的,可滿足大約99%的日常分析,這也是我國藥典規(guī)定用于藥檢的紫外分光光度計的光譜帶寬一定要求≤2nm的原因。研究表明:光度準確度測量時,必須注意紫外可見分光光度計光譜帶寬的選擇。
1、光譜帶寬小,則對應的狹縫寬度小,此時的雜散光也小,可提高吸光度測量的準確度。
2、光譜帶寬小,則對應的狹縫窄,但單色光的單色性也好,更能接近單色光,可減少Beer定律的偏離,提高測量精度。
3、光譜帶寬小,對同一自然帶寬來講,波長準確度會高,因為不同的波長,有不同的摩爾吸光系數(shù),所以,波長準確度高時,光度準確度測試誤差小。
但必須注意:光譜帶寬不能太小,否則信號弱,儀器的信噪比小,靈敏度差。
很多人會混淆紫外分光光度計狹縫寬度和光譜帶寬,其實這是不對的,原因如下:
1、狹縫寬度是指紫外可見分光光度計狹縫的機械寬度。一般來講,儀器的狹縫寬度是一個保密數(shù)據(jù)。因此,制造商不會或沒有必要在儀器說明書中、在有關的儀器樣本上給出儀器的狹縫寬度,所以講狹縫寬度為:多少是沒有根據(jù)的。
2、儀器制造商應該或必須告訴用戶儀器的光譜帶寬是多少。因為光譜帶寬是紫外可見分光光度計分析誤差的主要來源,往往不同的試樣要求用不同的光譜帶寬測試,對試樣來講,有理想的光譜帶寬的要求。